본 질량 분석기는 액체크로마토그래프와 연결되어 이온의 질량값을 확인하여 성분 확인 및 농도 확인이 가능한 장비. 이 장비는 특정 질량을 가진 Mass에 대한 분해능 480,000 이상까지 구현이 가능한 매우 뛰어난 장비로써, Unknown 물질의 성분 확인 능력 및 정량성이 매우 뛰어난 장비.
오비트랩 (Orbitrap) 기반의 고분해능 질량분석기를 활용하여 정확한 분자량을 고감도로 분석. 또한 오비트랩은 퓨리에 변환된 데이터를 사용하기 때문에 높은 dynamic range 와 높은 Signal to noise 를 보임. 이를 바탕으로 Vanquish Neo nanoLC 와 결합하여 다양한 단백질의 ID 및 고감도 정량, 단백질 간의 interaction 을 확인할 수 있음.
Orbitrap Exploris 480 질량분석기 주요 응용 분야 :
√ 바텀-업(bottom-up) 단백질체학 (Proteomics)
√ 단백질 서열분석 (peptide mapping)
√ 정량 분석 : 무표지(Label-free), TMT, SILAC, SureQuant 등
√ PTM 분석 : glycosylation, phosphorylation
√ 숙주 세포 단백질 분석 (Host cell protein)
√ Single cell proteomics
√ Protein-protein Interaction 분석
1. Resolution : 480,000 at m/z 200
2. Mass range : m/z 40–6,000
3. Scan rate : Up to 40 Hz at resolution setting 7,500 at m/z 200
4. Mass accuracy : < 3 ppm with external calibration
< 1 ppm using internal standard, lock masses
주요성능
1. 초고분해능 질량분석기
○ 최고 분해능: 모든 종류의 스캔과 극성에서 ≥480,000 (FWHM) @ m/z 200
○ 질량정확도:
a) 외부보정 후 별도의 재조정 작업 없이 24시간 이상 <3ppm RMS
b) 내부보정 기능을 통해 5일 이상 <1 ppm RMS
○ MS(SIM) 감도: S/N ≥ 150:1 @ 50 fg reserpine on column
○ MS/MS 감도: S/N ≥ 100:1 @ 50 fg reserpine on column
○ 정량분석용 직선형 동적 범위: ≥5 orders
○ 질량 범위: 40 ~ 6,000 m/z
○ 스캔 속도: 초당 40회 이상
○ 동시다중선택(multiplexed) MS/MS 개수: 서로 다른 선구이온 20개 이상
○ 극성 전환: 한번의 시료주입에서 ≤1 ppm RMS 질량정확도를 유지한 채로 한번의
full positive scan 및 full negative scan을 0.7초 이내에 수행
2. 고성능 나노 초고압 액체크로마토그래피
○ 2액 기울기 나노, 케필러리, 마이크로 용리 펌프
유속 범위: 1 nL/min – 100 μL/min
압력 범위: ≥ 1,500 bar (21,750 psi)
체류용량: ≤ 25nL
○ 자동시료주입장치
시료 트레이: 216 x 1.5 ㎖ 또는 그 이상
시료 주입량: 0.01 ~ 25 ㎕ 또는 그 이상
시료 주입 정확성: ≤ ±0.5%
시료 주입 정밀성: ≤ 0.25% RSD
시료 온도 조절 범위: 4 ~ 40°C
시료 온도 안정성: ≤ ±1℃
○ 컬럼 온도조절장치
온도 범위: ≥ 60℃
설정온도의 정밀성: ≤ ±0.1K
설정온도의 정확성: ≤ ±0.5 K